摘要
目的 建立香附饮片、清炒香附、香附炭的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别筛选差异标志物,并测定6种主要成分的含量,为进一步完善香附质量标准提供参考.方法 采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立21批香附样品的HPLC指纹图谱,进行相似度评价,确定共有峰个数;采用SIMCA14.1软件进行层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA),以变量重要性投影(variable importance in projection,VIP)＞1 为标准筛选出差异标志物;测定5-羟基甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素、香附烯酮、α-香附酮的含量.结果 21批HPLC指纹图谱的相似度均不小于0.934,共标定23个共有峰,指认3、10、11、17、21、23号峰分别为5-HMF、对香豆酸、阿魏酸、木犀草素、香附烯酮、α-香附酮;PCA结果、OPLS-DA结果与HCA结果一致,均可将21批香附样品分为3类;通过VIP筛选出2、23(α-香附酮)、17(木犀草素)、10(对香豆酸)、11(阿魏酸)号峰为导致样品差异的主要标志色谱峰;5-HMF的含量在香附炭中最高.对香豆酸、阿魏酸的含量在香附饮片、清炒香附、香附炭中逐渐增加.木犀草素在清炒香附中含量最高.α-香附酮含量经炒后略有增加.香附烯酮含量在香附饮片、清炒香附、香附炭中含量逐渐减少.结论 筛选出未知成分2号峰与已知成分α-香附酮、木犀草素、对香豆酸、阿魏酸为差异标志物;所建立的清炒香附的HPLC指纹图谱存在一定差异,且HPLC指纹图谱与含量测定方法操作简单、准确,能够为清炒香附药效物质基础研究提供实验依据,可为进一步完善香附质量标准提供参考.
基金项目
国家重点研发计划(2018YFC1707000)
河南省中医药科学研究专项(20-21ZY2095)
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