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基于AMPK/mTOR自噬通路研究甘草酸二铵对柯萨奇病毒B3病毒性心肌炎小鼠的保护作用

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目的 基于单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)自噬通路探究甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate，DG)对病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)小鼠心肌的保护作用及机制。方法 50只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、DG(19。5 mg/kg)组、DG(19。5 mg/kg)+Compound C(20 mg/kg)组和 DG(19。5 mg/kg)+Compound C(20 mg/kg)+雷帕霉素(2。0mg/kg)组，每组10只。采用试剂盒检测血清中肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB，CK-MB)活性、心肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ，cTnI)水平及心肌组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α，TNF-α)水平;采用苏木素-伊红(HE)和TUNEL染色分别检测心肌组织病理形态和细胞凋亡;采用qRT-PCR检测心肌组织柯萨奇病毒3(coxsackievirus B3，CVB3)mRNA表达;采用Western blotting检测心肌组织自噬、凋亡及AMPK/mTOR通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组心肌纤维部分断裂，有明显的细胞变形、出血和炎性细胞浸润，心肌细胞凋亡率、血清中CK-MB活性、cTnI水平及心肌组织IL-1β、TNF-α水平均显著升高(P＜0。05)，心肌组织CVB3 mRNA表达及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(cleaved cystein-asparate protease-9，cleaved Caspase-9)、cleaved Caspase-3、p62、p-mTOR/mTOR蛋白表达均显著升高(P＜0。05)，心肌组织微管相关蛋白轻链 3-Ⅱ/Ⅰ(microtubule-associated protein light chain 3-Ⅱ/Ⅰ，LC3-Ⅱ/Ⅰ)、Beclin-1、p-AMPK/AMPK蛋白表达均显著降低(P＜0。05)。与模型组比较，DG明显改善心肌形态，降低心肌细胞凋亡率、血清中CK-MB活性、cTnI水平及心肌组织IL-1β、TNF-α水平(P＜0。05)，下调心肌组织CVB3 mRNA表达及cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3、p62、p-mTOR/mTOR 蛋白表达(P＜0。05)，上调心肌组织 LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK蛋白表达(P＜0。05)。AMPK抑制剂Compound C能减弱DG的上述保护作用，且自噬激活剂雷帕霉素能抑制这种减弱作用。结论 DG可能通过激活AMPK/mTOR通路诱导自噬，减轻VMC小鼠心肌损伤。
Protective effect of diammonium glycyrrhizinate on mice with coxsackievirus B3 myocarditis by regulating AMPK/mTOR autophagy pathway

diammonium glycyrrhizinateviral myocarditisAMPK/mTOR pathwayautophagyapoptosis

岳丽晓、李登云、张晶晶、仝雷

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郑州工业应用技术学院微生物与免疫学教研室,河南新郑 450064

郑州工业应用技术学院药理学教研室,河南新郑 450064

甘草酸二铵 病毒性心肌炎 AMPK/mTOR通路 自噬 凋亡

2019年河南省科技发展计划

192102310416

2023

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.12.016

中草药
天津药物研究院,中国药学会

中草药

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.632
ISSN：0253-2670
年,卷(期)：2023.54(12)
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