目的分离和识别蚊媒疟原虫感染相关基因并探讨其机制.方法以斯氏按蚊-约氏疟原虫为实验模型,分别将刺叮约氏疟原虫感染鼠血和正常鼠血后24 h的饱血斯氏按蚊作为T组和D组,经抑制性差减杂交和选择性PCR扩增,建立一个T组表达特异增高基因的差减cDNA库.将此差减库分别与T组和D组的cDNAs混合探针作斑点杂交,筛选出差异表达基因,测定其序列并做基因库BLAST搜索.结果T组相对于D组的差异表达基因得到有效富集,58个重组克隆中有24个表达增高,阳性率为41.4%.所代表的23个基因搜索结果显示,12个与功能已知的基因同源,4个与功能未知的基因同源,7个为新发现的基因;其中9个与LPS诱导的冈比亚按蚊免疫反应性细胞系EST同源,占39.1%(9/23).结论建立了蚊媒感染疟原虫早期(24 h)直接导致的全基因组应答性表达增高cDNA库,筛选结果显示蚊虫对疟原虫感染的反应涉及多种生化途径及机制,尤其与天然免疫系统和能量代谢关系密切.
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