为了获得最佳的克氏原螯虾ISSR-PCR反应体系,采用单因素实验法将反应体系的Taq聚合酶、dNTPs和Mg2+3个主要因素设定5个梯度,根据每个因素量的变化对扩增结果产生的影响进行了研究,最后确定最佳反应体系为:总体积10μL,1 μL 10×Taq Buffer、dNTPs浓度0.6 mmol/L、0.6 U Taq DNA polymerase、MgCl2浓度1.8 mmol/L、20 ng DNA,引物浓度0.8 μmol/L.
Optimization of ISSR-PCR System in Procambarus clarkia
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