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甜菜M14品系BvM14-STPK蛋白激酶在原核表达系统中的低温诱导表达及纯化

Low Temperature Induced Expression and Purification of BvM14-STPK Protein Kinase from Sugar Beet M14 Line in Prokaryotic Expression System

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为获得纯化的BvM14-STPK蛋白激酶,采用低温16℃,0.5 mmol/L IPTG对转BvM14-STPK的大肠杆菌进行诱导,利用Ni2+亲和层析技术对菌液上清进行纯化,并利用SDS-PAGE对纯化蛋白进行检测.结果 表明37℃,0.5 mmol/L IPTG诱导后,BvM14-STPK蛋白以包涵体形式存在,不能对目的蛋白进行纯化分析研究;通过优化诱导条件,在低温16℃,0.5 mmol/L IPTG过夜诱导,在上清中获得大量BvM14-STPK可溶性目的蛋白,对菌液上清纯化并经SDS-PAGE检测到BvM14-STPK目的蛋白.在目的蛋白纯化过程中,发现150 mmol/L咪唑洗脱液纯化BvM14-STPK目的蛋白效果最好.本研究成功纯化出目的蛋白BvM14-STPK.

于冰、刘祥、李海英

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黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心,哈尔滨150500

黑龙江大学生命科学学院,黑龙江省普通高校分子生物学重点实验室,哈尔滨150080

甜菜M14品系 BvM14-STPK 低温诱导 纯化

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2019

中国农学通报
中国农学会

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CSTPCD
影响因子：0.891
ISSN：1000-6850
年,卷(期)：2019.35(3)
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