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实时荧光定量PCR筛选鸡基因表达最佳内参基因

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为筛选在鸡基因表达时稳定表达的内参基因,本试验以6、14、22及30周龄的地方品种固始鸡与6周龄的商业品种罗斯308肉鸡为试验动物,以B2M、28S、GAPDH、β-actin及HSP70为候选内参基因,利用qRT-PCR对这5个候选内参基因的相对表达量进行测定,通过独立评价软件geNorm、NormFinder、SPSS和Ct值分析法筛选出在不同组织、不同发育时期和不同品种间稳定表达的最佳内参基因.结果 表明:在鸡不同组织中,28S为最佳内参基因;在鸡不同发育时期中,GAPDH为最佳内参基因;在不同品种鸡中最佳内参基因组合为GAPDH和28S.综上所述,在以地方品种固始鸡为例的不同组织,不同时期间最佳内参基因分别为28S和GAPDH;以地方品种固始鸡和商业品种罗斯308肉鸡为例的不同品种间最佳内参基因为GAPDH+ 28S基因组合.综上,本研究筛选出了鸡不同试验条件下的最佳内参基因,为规范鸡基因定量表达分析中内参基因的使用提供参考依据.
Screening optimum reference gene for gene expression in chicken by quantitative real-time PCR

李毅毅、张彦华、吴俊锋、张晨曦、康相涛、李文婷

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河南农业大学动物科技学院,郑州450000

鸡 内参基因 geNorm NormFinder

国家自然科学基金河南省重点研发项目2020年度河南省高等学校重点科研项目

3190214419210211007020B23007

2021

10.11841/j.issn.1007-4333.2021.04.07

中国农业大学学报
中国农业大学

中国农业大学学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.971
ISSN：1009-508X
年,卷(期)：2021.26(4)
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