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转基因大豆'ZH 10-6'数字PCR精准定量检测方法的建立

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为实现转基因耐除草剂大豆品种'ZH 10-6'转化体成分的精准定量检测,以转基因大豆'ZH 10-6'的5'端边界序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针浓度进行优化,经特异性测试,建立了耐除草剂大豆品种'ZH 10-6'的微滴式数字PCR检测方法.结果 表明:1)特异性良好:只有以转基因耐除草剂大豆品种'ZH 10-6'基因组为模板才有扩增信号;2)灵敏度高:在相对标准偏差≤25％的情况下,方法的检出限(LOD)为13.0个拷贝;定量限(LOQ)为66.0个拷贝;3)PCR扩增反应模板含量与样品拷贝数之间线性相关系数R2 ＞0.99,DNA含量线性范围为0.08％～100.00％.综上,本研究建立的转基因耐除草剂大豆'ZH 10-6'转化体定量方法特异性强、稳定性好、准确度和灵敏度高,可用于对转基因大豆品种'ZH 10-6'的定量检测.
Establishment of digital PCR method for quantitative detection of genetically modified soybean 'ZH10-6'

刘双、赵新、李瑞环、刘娜、兰青阔、檀建新、王永

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天津市农业科学院生物技术研究所,天津300381

河北农业大学食品科技学院,河北保定071001

微滴式数字PCR 转基因耐除草剂大豆'ZH 10-6' 精准定量 转化体特异性

转基因重大专项转基因重大专项

2019ZX08013-0022019ZX08004001

2021

10.11841/j.issn.1007-4333.2021.11.05

中国农业大学学报
中国农业大学

中国农业大学学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.971
ISSN：1009-508X
年,卷(期)：2021.26(11)
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