摘要
酸性海藻糖酶作为生物催化剂在生物工业中广泛应用,挖掘酶学性质优良的酸性海藻糖基因具有重要意义.从Bispora sp.MEY-1 中成功克隆出一个酸性海藻糖酶基因TreA,并在毕赤酵母GS115 中实现高效表达.对纯化后的酸性海藻糖酶TreA进行酶学性质鉴定,其最适pH 为4.0,在pH 2.2～5.0范围内,该酶能够维持60％以上的酶活力.TreA在偏酸条件下稳定效果比较好,在pH 1.0～4.0条件下处理1 h,可以剩余88％以上的酶活力.TreA 的最适温度为60℃,在40～70℃之间都可以维持50％以上的酶活力,属于中高温酶.重组海藻糖酶TreA 的比活为1 913 U·mg-1,动力学参数Km和Vmax分别为0.67 mg·mL-1和119 μmol·min-1·mg-1.同时,还评估了不同金属离子或化学试剂对纯海藻糖酶TreA 的酶活性影响及其蛋白酶抗性.极大丰富了海藻糖酶基因资源,促进了其在生物工业中的应用.
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