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肉中猪源性成分Real-time PCR定量检测技术

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[目的]建立一种快速、准确的肉中猪源性成分定量检测方法.[方法]首先从GenBank数据库中筛选猪特异性的微卫星DNA,根据微卫星DNA核酸序列设计引物,对常见10种动物基因组DNA进行PCR扩增,通过有无扩增产物判断筛选的微卫星DNA对猪源性成分的特异性.然后根据微卫星DNA核酸序列,设计特异性引物和探针,建立猪源性成分Real-time PCR检测方法,采用双标准曲线分别对猪源性成分和总动物源性成分进行定量,计算猪源性成分的百分含量.[结果]筛选到猪特异性微卫星DNA(Accession EF172428),根据其序列设计的引物SEQ-sus2-F/R只能从猪基因组DNA中扩增出目的条带,其他动物的基因组均无目的条带扩增.建立的Real-time PCR检测方法灵敏度为0.02 ng/25μL反应体系.该方法能够准确检测出混合DNA样品中猪源性成分和混合肉样品中猪源性成分,百分误差分别约为1.32％和1.06％—7.12％.[结论]本研究利用Real-time PCR技术建立的定量猪源性成分的检测方法可以用来检测猪源性成分在混合样品中的百分含量.
Quantitative Detection Technology of Porcine-Derived Materials in Meat by Real-time PCR

翟晓虎、李翎旭、陈小竹、蒋怀德、贺卫华、姚大伟

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江苏农牧科技职业学院,江苏泰州 225300

南京农业大学动物医学院,南京 210095

肉 猪 动物源性成分 Real-time PCR 定量

国家自然科学基金青年基金泰州市科技支撑计划社会发展(指导性)项目

30471225TS202019

2023

10.3864/j.issn.0578-1752.2023.01.012

中国农业科学
中国农业科学院

中国农业科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.899
ISSN：0578-1752
年,卷(期)：2023.56(1)
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