[目的]探明采自云南和海南表现为黄化、皱缩等表型的花叶青木病毒种类.[方法]首先,利用转录组测序技术对来自云南省昆明市的花叶青木样品进行检测;然后,根据转录组测序结果,采用RT-PCR对采自云南省昆明市和海南省海口市的 73 份花叶青木样品开展转录组测序结果中发现的病毒种类检测验证,并扩增获得相关病毒基因片段,对这些病毒的基因序列进行比对分析.[结果]转录组测序结果发现,送测的花叶青木样品中含有蚕豆萎蔫病毒 2 号(broad bean wilt virus 2,BBWV2)、菜豆黄花叶病毒(bean yellow mosaic virus,BYMV)、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)、豌豆耳突花叶病毒 1 号(pea enation mosaic virus 1,PEMV-1)和豌豆耳突花叶病毒 2 号(pea enation mosaic virus 2,PEMV-2)5 种病毒的侵染.但随后对来自云南和海南的 73 份花叶青木样品的RT-PCR验证中,只检测到BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2 4 种病毒.其中,云南和海南的样品中均能检测到BBWV2,总检出率为 11.0%;而BYMV、CMV和PEMV-2仅在云南的样品中被检测到,检出率分别为 5.5%、1.4%和 1.4%.从两地采集的花叶青木样品中既未发现PEMV-1 的侵染,也未发现BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2 的复合侵染.为了进一步分析BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2 花叶青木分离物与来自其他寄主植物相关病毒分离物的分子变异,选取检测到上述 4 种病毒的样品,分别对BBWV2、BYMV和CMV 3 种病毒的cp及PEMV-2 的RdRp序列进行扩增,并对扩增获得的BBWV2 490 nt的small cp(GenBank登录号:OQ137565、OQ137566)、BYMV 499 nt的cp核心区域(GenBank登录号:OQ137568)、CMV 880 nt的cp(GenBank登录号:OQ137567)和PEMV-2 800 nt的RdRp核心区域序列(GenBank登录号:OQ137569)进行分析.序列比对分析结果表明,BBWV2 云南与海南花叶青木分离物间存在 85.9%的核苷酸序列一致性,二者与GenBank中其他BBWV2 分离物分别存在 79.8%—94.5%和 80.2%—92.0%的核苷酸序列一致性;BYMV、CMV和PEMV-2 云南花叶青木分离物与GenBank中相应病毒的核苷酸序列一致性分别为 79.8%—99.0%、71.5%—99.4%和 84.9%—98.0%.利用以上病毒相应基因核苷酸序列构建系统发育树,发现BBWV2 云南和海南花叶青木分离物分别属于I组中的a亚组和b亚组;BYMV云南花叶青木分离物与伊朗(GenBank登录号:MN241051,MN241060)和伊拉克(GenBank登录号:JQ026005)蚕豆分离物具有较近的亲缘关系;CMV云南花叶青木分离物属于I组中的IB亚组,但与IB亚组的其他成员具有较远的亲缘关系;PEMV-2 云南花叶青木分离物与云南豌豆分离物亲缘关系最近并聚为一组,但与其他分离物存在较远的亲缘关系.[结论]首次报道了花叶青木被病毒感染,同时也是BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2在花叶青木乃至桃叶珊瑚属植物上的首次报道,BBWV2、BYMV、CMV和PEMV-2 花叶青木分离物与来自其他植物的相关病毒分离物存在较大的分子变异.
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