摘要
背景 炎症反应是脑出血(ICH)病情进展的主要因素.青蒿琥酯(ART)具有抗菌和抗炎的药理活性,ART在脑内浓度较高,但对脑出血损伤的神经保护作用尚不清楚.目的 观察ICH后ART对炎症反应的影响并探讨其机制.方法 2022年3月—2023年2月选取108只8～10周雄性SPF级C57BL/6小鼠,随机分为假手术组(Sham组,n=36)、ICH对照组(ICH+Vehicle组,n=36)、ART治疗组(ICH+ART组,n=36),建立ICH模型,ICH+ART组在造模后2 h腹腔注射ART溶液150 mg·kg-1·d-1,ICH+Vehicle组腹腔注射5％碳酸氢钠溶液,连续注射3 d.观察小鼠行为学指标,HE染色观察各组小鼠脑组织损伤情况,免疫组织化学染色检测白介素(IL)6、IL-1β、髓过氧化物酶(MPO)单位面积阳性细胞数,兔抗小胶质标志物(IBA1)免疫荧光染色观察小胶质细胞/巨噬细胞的激活情况,TUNEL/NeuN免疫荧光双染色观察神经元死亡情况,蛋白质印迹法比较小鼠MPO、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)水平.结果 ICH+Vehicle组改良神经系统严重程度评分、右转弯的百分比高于Sham组,ICH+ART组低于ICH+Vehicle组(P<0.05).HE染色结果示Sham组纹状体周围有少量血液,水肿可忽略不计,ICH+Vehicle组脑组织严重损伤,细胞间隙增加、血管周围血肿、炎性细胞浸润增加;ICH+ART组上述症状均有明显改善.ICH+Vehicle组IL-6、IL-1β、MPO单位面积阳性细胞数均高于Sham组,ICH+ART组IL-6、IL-1β、MPO单位面积阳性细胞均低于ICH+Vehicle组(P<0.05).ICH+Vehicle组小胶质细胞/巨噬细胞激活数高于Sham组,ICH+ART组低于ICH+Vehicle组(P<0.05).3组小鼠神经元死亡数量比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中ICH+Vehicle组高于Sham组,ICH+ART组低于ICH+Vehicle组(P<0.05).ICH+Vehicle组MPO、IL-1β、TNF-α、NLRP3、ASC和Caspase-1水平均高于Sham组,ICH+ART组MPO、IL-1β、TNF-α、NLRP3、ASC和Caspase-1水平均低于ICH+Vehicle组(P<0.05).结论 ICH后ART治疗可通过靶向调节NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路减轻小鼠纹状体炎症反应,减少小胶质细胞激活,最终减轻纹状体神经元凋亡并改善脑水肿.
基金项目
国家自然科学基金(8207052870)
国家自然科学基金重点国际(地区)合作研究项目(81520108011)
国家重点研发计划(2018YFC1312200)
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