摘要
基于抗原抗体特异性反应和纳米金荧光增强效应构建了牛乳酪蛋白及其水解物的新型检测方法.实验以纳米金为载体,首先将抗体以非共价键结合于纳米金表面,根据抗原抗体特异性反应与异硫氰酸荧光素(FITC)标记蛋白结合,基于纳米金荧光增强效应使标记体系荧光达到最大,待测蛋白和FITC标记蛋白竞争性与金标抗体结合,通过检测荧光强度,从而间接测定蛋白质含量.通过一系列优化实验建立检测体系,结果为:酪蛋白荧光标记率为1.35,为充分标记;检测体系中抗原的最适加入量为30μg/mL.方法检测线性范围为0.2～1μg/mL,最低检测限为0.2μg/mL,可重复试验变异系数均小于6％.研究结果表明所建立的纳米金荧光增强检测方法具有简单快速、操作简单、重复性好,可用于牛乳酪蛋白及其水解物的定量检测.
基金项目
陕西省科技统筹计划项目(2013KTZB02-052)
陕西省教育厅服务地方专项项目(19JC05)
西安市科技计划农业科技创新工程项目(20193035YF023NS023)
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