摘要
为了深入研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)P-8在抗生素环境中的适应性进化机制,本研究采用基因敲除技术对膜蛋白基因的生物学功能进行了验证.首先,运用PCR技术扩增膜蛋白基因(LBP_cg0719)的同源臂序列,构建带有内部缺失LBP_cg0719基因的敲除载体;其次,采用Cre/lox基因重组系统,筛选双交换子L.plantarum P-8-A-1600-0719::lox66-P32-cat-lox71;最后,通过消除抗性基因,获得了突变株L.plantarum P-8-A-1600-0719,并对其耐药表型进行检测.结果表明,氨苄西林浓度为16μg/mL时,突变株L.plantarum P-8-A-1600-0719与抗生素菌株L.plantarum P-8-A-1600相比,浊度提高约2倍.因此,膜蛋白基因对植物乳杆菌P-8适应氨苄西林环境具有一定的调节作用.