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PMA-RF-SRCA检测乳中单增李斯特氏菌活菌

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本研究建立了一种叠氮溴化丙锭(PMA)与实时荧光跨越式滚环等温扩增(RF-SRCA)相结合的方法,可以高效灵敏检测乳中活的单增李斯特氏菌.以hlyA基因为靶点,设计并筛选出特异性引物,通过对PMA的工作浓度、暗孵育时间和光反应时间进行优化,确定了最佳的处理条件.此外,对该方法的特异性、灵敏度及检出限进行了分析.结果表明,该方法引物特异性良好,6株单增李斯特氏菌结果均为阳性,12株非单增李斯特氏菌结果均为阴性;当PMA工作浓度为30 μmol/L、暗孵育10 min、光反应15 min时,所建立的方法灵敏度为3.9 CFU/mL,人工污染乳制品的检出限为1.56×10 CFU/mL.综上所述,本研究所建立的PMA-RF-SRCA方法特异性强,灵敏度高,为检测食品中活的单增李斯特氏菌提供了新的思路.
Detection of Live Listeria Monocytogenes in Milk by Real-time Fluorescence Saltatory Rolling Circle Amplification Combined with Propidium Monoazide

王新潮、张蕴哲、杨倩、卢鑫、徐慧、张伟

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河北农业大学食品科技学院 河北 保定071001

河北大学公共卫生学院 河北 保定071002

河北农业大学理工学院 河北 沧州061100

河北农业大学生命科学学院 河北 保定071001

河北省人畜共患病原微生物分析与防控重点实验室 河北 保定071001

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跨越式滚环等温扩增(SRCA) 叠氮溴化丙锭(PMA) 单增李斯特氏菌 hlyA基因 乳品

国家基金面上项目国家基金面上项目河北省自然科学基金重点项目河北省高等学校科学技术研究项目河北省人才引进计划中央引导地方科技发展资金项目-基础研究项目河北农业大学食品加工学科群经费项目河北大学高层次人才科研启动项目

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2022

10.19827/j.issn1001-2230.2022.08.009

中国乳品工业
黑龙江乳品工业技术开发中心,中国乳制品工业协会

中国乳品工业

CSTPCD北大核心
影响因子：0.41
ISSN：1001-2230
年,卷(期)：2022.50(8)
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