重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ用pET31b载体的表达和纯化
Expression of Recombinant HWTX-Ⅰ Gene by pET31b Vector and Purification of Product
刁建波 1刘君梁 2梁宋平2
作者信息
- 1. 北京大学,蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京,100871
- 2. 湖南师范大学,生命科学学院,长沙,410081
- 折叠
摘要
化学全合成虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)基因在大肠杆菌中被表达, 采用pET31b载体,表达产物N端为大肠杆菌酮基立体异构酶的融合蛋白,经亲和连续6个组氨酸的亲和柱层析后,溴化氰切割融合蛋白,再经高效液相色谱反相柱纯化,得到了重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ.质谱分析及N端测序表明,rHWTX-Ⅰ系正确表达产物. 还原复性的rHWTX-Ⅰ表现出与天然HWTX-Ⅰ一致的生物学活性.
关键词
虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ,pET31b,表达与纯化,溴化氰,变复性引用本文复制引用
出版年
2003