中国生物化学与分子生物学报2005，Vol.21Issue(1) ：39-44.

重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ用pMAL-p2X载体的表达和纯化

Expression and Purification of Recombinant Huwentoxin-Ⅺ by pMAL-p2X Vector

刘君梁 刁建波 唐建洲 谢锦云 梁宋平
中国生物化学与分子生物学报2005，Vol.21Issue(1) ：39-44.
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重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ用pMAL-p2X载体的表达和纯化

Expression and Purification of Recombinant Huwentoxin-Ⅺ by pMAL-p2X Vector

刘君梁 1刁建波 2唐建洲 1谢锦云 1梁宋平1
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作者信息

  • 1. 湖南师范大学生命科学学院,长沙,410081
  • 2. 北京大学生命科学学院,蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京,100871
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摘要

虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ基因通过PCR扩增,插入pMAL-p2X载体,基因5'端插入凝血酶切割位点.在大肠杆菌中经IPTG诱导高效分泌表达.表达产物N端含麦芽糖结合蛋白,融合蛋白被分泌到大肠杆菌的胞间质.经冷渗透休克后,透析脱盐,用凝血酶切割融合蛋白,再经SuperdexTM75分子筛柱层析、高效液相色谱反相C18柱纯化,得到重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ.质谱分析表明,rHWTX-Ⅺ系正确表达产物,重组HWTX-Ⅺ表现出与天然HWTX-Ⅺ一致的生物学活性.

关键词

虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ,pMAL-p2X,凝血酶,胰蛋白酶抑制剂

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基金项目

国家自然科学基金(30170193)

出版年

2005
中国生物化学与分子生物学报
中国生物化学与分子生物学会 北京大学

中国生物化学与分子生物学报

CSCD北大核心
影响因子：0.617
ISSN：1007-7626
被引量4
参考文献量6
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