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PRRSV2b蛋白互作宿主细胞蛋白的筛选

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目的 通过酵母双杂交筛选技术从猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)cDNA文库中筛选与猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)2b蛋白互作的宿主细胞蛋白.方法 将PRRSV 2b基因扩增产物克隆至pGBKT7质粒上,构建重组钓饵载体pGBKT7-2b,转化至Y2H Gold酵母感受态中制备钓饵菌株后,进行自激活和毒性检测;将PAM cDNA文库菌株与钓饵菌株进行杂交融合,经DDO/X/A平板筛选后,对筛选的菌株进行PCR鉴定及测序分析.结果 构建的钓饵菌株无毒性和自激活现象;共获得LGALS1、RPL12、LGALS3和RPS20 4种蛋白.结论 成功构建了可用于双杂交筛选的钓饵菌株,筛选出4种与PRRSV 2b蛋白互作的PAM蛋白,其中LGALS1出现概率最高.
Screening of host cell proteins interacting with 2b protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus

崔一龙、邓守全、杨达汉、薛江东、马德慧

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内蒙古民族大学动物科学与技术学院,内蒙古通辽028000

内蒙古自治区肉牛疾病防控工程技术研究中心,内蒙古通辽028042

猪繁殖与呼吸综合征病毒 2b蛋白 互作蛋白 猪肺泡巨噬细胞

国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金

314606622017MS0319

2019

中国生物制品学杂志
中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司

中国生物制品学杂志

CSTPCDCSCD
影响因子:0.417
ISSN:1004-5503
年,卷(期):2019.32(4)
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