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多重位点特异性PCR同时鉴别酸枣仁及其掺伪品

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目的:优化并建立多重位点聚合酶链式反应(PCR)体系同时鉴别酸枣仁、枳椇子和理枣仁及不同掺伪量,解决酸枣仁药材商品及其制剂的掺伪难题.方法:通过分析比对酸枣仁及其伪品的内部转录间隔区(ITS)序列差异找到特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计特异性鉴别引物,通过优化退火温度、循环次数及引物浓度,评估不同聚合酶种类和不同PCR仪等扩增条件对不同来源的酸枣仁、枳椇子及理枣仁样品进行特异性扩增,根据特异性扩增条带大小进行鉴别,并对最低检测限和掺伪检出限进行研究.结果:在退火温度为63℃,循环次数为23次时,酸枣仁、枳椇子和理枣仁分别扩增出549、169、389 bp的特异性条带.该方法对酸枣仁和理枣仁的最低检测限为0.24 ng,枳椇子为1.2 ng,对酸枣仁、枳椇子和理枣仁的掺伪检出限分别为0.5％、2％和2％.结论:该文建立的多重位点特异性PCR鉴别方法能同时准确鉴别酸枣仁、枳椇子和理枣仁,对解决酸枣仁药材掺伪问题提供基础研究,为控制酸枣仁药材质量安全及临床应用提供参考.
Simultaneous Identification of Ziziphi Spinosae Semen and Its Adulterants by Multiplex Allele-specific PCR

李柯帆、索晓雄、李晓兰、杜晨晖、闫艳、裴香萍

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山西中医药大学中药与食品工程学院,山西晋中030619

山西大学中医药现代研究中心,太原030006

酸枣仁 枳椇子 理枣仁 多重位点特异性聚合酶链式反应(PCR) 鉴别 掺伪

山西省中药现代化振东专项国家自然科学基金青年科学基金

2016ZD010481603251

2023

10.13422/j.cnki.syfjx.20221315

中国实验方剂学杂志
中国中医科学院中药研究所　中国中西医结合学会中药专业委员会

中国实验方剂学杂志

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.62
ISSN：1005-9903
年,卷(期)：2023.29(2)
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