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塞内卡病毒LAMP可视化快速检测方法的建立及初步应用

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为建立塞内卡病毒(SVA)的快速检测方法，本研究在SVA高度保守区域，分别设计了 5对特异性LAMP引物，并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测，建立了一种经济、特异、敏感的SVA检测方法。在62℃水浴55 min扩增出大于220 bp的特异性阶梯状条带，以质粒为模板进行敏感性试验结果表明该方法在5。1 copies/μL时仍可以检测出SVA，比普通PCR敏感1000倍。特异性试验结果显示该方法与猪肺炎支原体(MPH)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合增病毒(PRRSV)均无交叉反应，应用该方法检测72例临床疑似病料，阳性率为33％(24例)。与普通PCR相比较，该方法操作简便、快速、特异、经济，本研究提供了一种更适于临床检测的SVA检测方法。
Development and Preliminary Application of LAMP Visual Rapid Detection Method of Seneca Virus A
In order to develop a rapid detection method for Seneca virus A(SVA),five pairs of specific LAMP primers in the highly conserved region of SVA genome were designed in this study.A specific ladder-like band larger than 220 bp was amplified in 62℃ water bath for 55 min.The resulting plasmid was used as the template for sensitivity test.The results showed that the method detected SVA at 5.1 copies/μL,which was 1000 times more sensitive than the conventional PCR.The results of specificity test showed that there was no cross-reactivity with Mycoplasma hyopneumoniae(MPH),porcine pseudorabies virus(PRV),porcine circovirus type 2(PCV2),porcine circovirus type 3(PCV3),swine fever virus(CSFV)and porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV).In addition,72 cases suspected of SVA infection was tested using this method and the positive rate was 33％(24/72).Compared with the conventional PCR,the LAMP visual method developed here was simple,rapid,specific and economical,which provided a more suitable method for clinical detection of SVA.

Seneca virus Aloop-mediated isothermal amplificationrapid detection

田瑶、李琛、杨莹、李佳昕、王硕、时建立、彭喆、徐绍建、吴晓燕、刘畅、韩红、韩先杰、李俊

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青岛农业大学动物医学院,青岛 266109

山东省农业科学院畜牧兽医研究所,济南 250100

山东师范大学生命科学院,济南 250100

塞内卡病毒 环介导等温扩增 快速检测

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2023CXGC010705SDAIT-08-062023TSGC073432302911ZR2022MC011202228112CXGC2018E10

2024

中国动物传染病学报
中国农业科学院上海兽医研究所

中国动物传染病学报

CSTPCD北大核心
影响因子：0.651
ISSN：1674-6422
年,卷(期)：2024.32(3)
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