用Wicks法提取pcDNA-GRF(1～32)质粒并用DNA CacuLator定量,同时制备原生质体.将54只家兔随机分为9组,分别注射质粒pcDNA-GRF(1～32)0.4(用布比卡因处理)、0.4(含10%甘油)、0.4(含25%蔗糖)、0.2、0.4、0.6、0.8 mg及空质粒0.1 mg和原生质体1 mL(Ⅰ～Ⅸ组).分别于注射后0、3、8、14、19、24、31 d称重;于注射后0、3、8、19、31 d采血并分离血清,测定血清中GH浓度,用t检验进行统计学分析.结果表明,布比卡因处理组注射后3 d内GH浓度升高65%(P＜0.01),平均日增重29 g(P＜0.05);注射0.8 mg组31 d平均日增重较对照组多34.62%;注射原生质体组31 d平均日增重较对照组多40.57%(P＜0.05).31 d后将家兔屠宰,取注射部位肌肉提取DNA和总RNA,用PCR和RT-PCR方法分别检测到了GRF在肌肉中的存在和表达;用ELISA方法没能检测到血清中的GRF抗体.
NETL
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万方数据
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