目的该科合成芳香酯酶(Arylester hydrolase EC 3.1.1.2,ArE)底物4-已酰氧基-3-甲氧基-ω-硝基乙烯;建立手工的和自动生化仪检测方法;评价在常见肝病中的应用.方法底物合成:香草醛加冰乙酸、乙酸铵.在乙醇溶液中用硝基四烷进行硝基化,滤取结晶.用乙酸酐进行酯化,滤取结晶,重结晶.方法建立.程序:取pH8.6Tris-HCL缓冲液2.5 ml,加血清30 ul,再加3mmol/l底物液0.4 ml,37℃10 min,加5 ml/dl正丁醇3 ml.混匀,在520nm,读取吸光度.摩尔消光系数(20345±280)A.计算:ArE U/L=971.3×A.结果反应条件:底物溶剂以甲醇13.65%为最佳.产物光吸收峰498nm,选用520 nm,吸光度达93.20%.择取pH8.6缓冲液,加0.51 mmol/L Ca2+和68.3 mmol/L Na+可提酶活力14.00%.批间CV为3.21%～4.52%.溶血、黄疸和脂血标本对ArE结果无干扰.临床应用:90例健康人ArE(470.6±49.7)U/L,参考值:＜421U/L.肝硬化、肝癌、肝炎3组ArE结果x±S,U/L分别是(266±77),(35±84)和(366±111);ROC曲线下面积分别是0.979,0.910和0.807.面积愈大诊断价值愈高,ArE愈低,肝功能愈差.尤其对肝硬化、肝癌.肝硬化组＜421 U/L阳性率为92.30%;肝癌ArE(Y)与脂碱脂酶CHE相关系数为0.909,Y=0.045X+190.53.结论ArE简便可靠.在肝硬化、肝癌、肝炎中阳性率性高,特异性好.有望成为重要常规肝功指标.
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