摘要
目的 探究长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(lncRNA UCA1)通过靶向miR-206调控Yes相关蛋白1(YAP1)的表达,介导口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡的分子机制.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人正常口腔角质细胞系HOK和人口腔鳞状细胞癌细胞株TSCCA、SCCl5、HN13、CAL27、HSC3和SCC9中lncRNA UCA1和microRNA-206(miR-206)的表达;在HN13细胞中敲除IncRNA UCA1,采用CCK-8法和流式细胞术检测其对HN13细胞增殖和细胞凋亡的影响;通过生物信息学网站starBase预测IncRNA UCA1、YAP1与miR-206的互补结合位点,并通过双荧光素酶实验验证它们之间的结合关系;Western blotting检测YAP1蛋白的表达.结果 qRT-PCR结果显示,相比于人正常口腔角质细胞系HOK,6种OSCC细胞中lncRNA UCA1mRNA相对表达量上调(P<0.05),而miR-206mRNA相对表达量均降低(P<0.05).与转染siNC的对照组相比,siUCA1组细胞活力下降,凋亡比例升高(P<0.05).生物信息学预测结合双荧光素酶实验证实miR-206与lncRNA UCA1、YAP1均存在互补结合.qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,siUCA1组miR-206mRNA相对表达量较对照组升高(P<0.05),YAP1mRNA相对表达量较对照组降低(P<0.05),而同时转染siUCA1和miR-206 inhibitor则抑制miR-206表达,恢复YAP1的表达(P<0.05).结论 lncRNA UCA1在OSCC细胞中高表达,通过抑制miR-206的表达,上调YAP1,从而促进OS-CC细胞增殖,抑制凋亡.
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