摘要
目的 探讨白藜芦醇对银屑病细胞生长的影响及其作用机制.方法 不同浓度的角质细胞生长因子(KGF)诱导人永生角质形成细胞(HaCaT),显微镜观察及四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测HaCaT细胞增殖.选出最佳浓度作用HaCaT细胞复制银屑病模型,采用不同浓度白藜芦醇作用HaCaT细胞,计算半抑制浓度(IC50),根据IC50选出后续实验白藜芦醇的浓度;将银屑病模型细胞分为阴性对照组(30μg/L生理盐水),2.5μmol/L、5.0μmol/L、7.5μmol/L白藜芦醇组,阳性对照组(5.0μg/mL维A酸)及空白对照组(未加任何药物),MTT法检测各组银屑病模型细胞的增殖,流式细胞术检测各组银屑病模型细胞的凋亡率,Western blotting检测各组银屑病模型细胞Caspase-3、p-ERK1/2、p-P38蛋白的表达.结果 不同KGF浓度组HaCaT细胞0 h、12 h、24 h、48 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点的OD值有差异(P<0.05);②不同浓度组的OD值有差异(P<0.05),40 ng/mL KGF组的OD值高于其他浓度组;③不同浓度组OD值的变化趋势有差异(P<0.05),40 ng/mL KGF组的OD值从24 h开始明显高于其他浓度组.0μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L、4.0μmol/L白藜芦醇作用HaCaT细胞24 h后的OD值比较,差异有统计学意义(P<0.05),白藜芦醇浓度升高OD值降低,白藜芦醇可抑制HaCaT细胞增殖,IC50值约5.3μmol/L.空白对照组、阴性对照组、2.5μmol/L白藜芦醇组、5.0μmol/L白藜芦醇组、7.5μmol/L白藜芦醇组、阳性对照组银屑病模型细胞24 h、48 h、72 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点的OD值有差异(P<0.05);②各组OD值有差异(P<0.05),③各组OD值的变化趋势有差异(P<0.05),从48 h开始,5.0μmol/L、7.5μmol/L白藜芦醇对银屑病模型细胞具有一定的抑制增殖作用.空白对照组、阴性对照组、2.5μmol/L白藜芦醇组、5.0μmol/L白藜芦醇组、7.5μmol/L白藜芦醇组、阳性对照组银屑病模型细胞的凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05),5.0μmol/L、7.5μmol/L的白藜芦醇对银屑病模型细胞有促凋亡作用.5.0μmol/L白藜芦醇组、7.5μmol/L白藜芦醇组、阳性对照组与阴性对照组和空白对照组比较,Caspase-3蛋白相对表达量升高(P<0.05),p-ERK1/2、p-P38蛋白相对表达量降低(P<0.05).结论 白藜芦醇可能是通过抑制ERK/MAPK和/或P38/MAPK通路发挥作用进而抑制银屑病细胞增殖并促进其凋亡,具体作用机制还有待更深入研究.
基金项目
包头市医药卫生基金(2017S2001-1-11)
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