摘要
目的 探讨银杏叶提取物对食管癌细胞EC9706增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响及机制.方法 食管癌细胞EC9706分为对照组(不做任何处理)、不同浓度银杏叶提取物组(100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L银杏叶提取物)、银杏叶提取物+白细胞介素-6(IL-6)组(20 ng/ml IL-6和400 mg/L银杏叶提取物).采用CCK-8法检测各组细胞的光密度(OD)值;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭;Western blotting检测细胞增殖核抗原Ki-67、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、磷酸化酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)蛋白相对表达量.结果 对照组,100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L银杏叶提取物组,银杏叶提取物+IL-6组细胞OD值比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,不同浓度银杏叶提取物组EC9706细胞OD值均降低(P<0.05),细胞活性降低,且呈浓度依赖性;银杏叶提取物+IL-6组较400 mg/L银杏叶提取物组EC9706细胞活性升高(P<0.05).5组的细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,不同浓度银杏叶提取物组EC9706细胞凋亡率升高(P<0.05),且呈浓度依赖性;银杏叶提取物+IL-6组EC9706细胞凋亡率较400 mg/L银杏叶提取物组降低(P<0.05).5组细胞的Ki-67、Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度银杏叶提取物组Ki-67蛋白相对表达量较对照组均降低(P<0.05),银杏叶提取物+IL-6组Ki-67蛋白相对表达量较400 mg/L银杏叶提取物组升高(P<0.05);不同浓度银杏叶提取物组Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量较对照组均升高(P<0.05),银杏叶提取物+IL-6组Cleaved-caspase-3蛋白相对表达量较400 mg/L银杏叶提取物组降低(P<0.05).对照组、400 mg/L银杏叶提取物组、银杏叶提取物+IL-6组细胞的MMP-2、MMP-9、p-JAK2、p-STAT3蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);400 mg/L银杏叶提取物组较对照组均降低(P<0.05),银杏叶提取物+IL-6组较400 mg/L银杏叶提取物组均升高(P<0.05).对照组、400 mg/L银杏叶提取物组及银杏叶提取物+IL-6组EC9706细胞迁移数、细胞侵袭数比较,差异有统计学意义(P<0.05);400 mg/L银杏叶提取物组EC9706细胞迁移数、细胞侵袭数较对照组减少(P<0.05),银杏叶提取物+IL-6组EC9706细胞迁移数、细胞侵袭数较400 mg/L银杏叶提取物组增多(P<0.05).结论 银杏叶提取物可能通过阻断JAK2/STAT3信号通路抑制食管癌细胞EC9706增殖、侵袭、迁移,促进细胞凋亡.
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