摘要
目的 观察外泌体(Exos)源性microRNA-124(miR-124)对急性创伤性脊髓损伤(ASCI)大鼠脊髓小胶质细胞(MG)活化及炎症反应的影响.方法 取对数期HEK239细胞,分为空白组、转染组.空白组不处理,转染组转染miR-124-mimics质粒.从35只大鼠中随机选取10只仅咬除椎板显露脊髓,不进行损伤处理,设为假手术组;其余25只复制ASCI模型,模型复制成功20只,随机分为ASCI组、实验组,每组10只.分离含有miR-124的Exos,鉴定后用于后续实验.模型复制成功后24 h,实验组经尾静脉注射Exos 3×109个微粒,假手术组及ASCI组注射等量PBS溶液.实时荧光定量聚合酶链反应检测脊髓组织miR-124的表达;流式细胞术检测脊髓组织MG占比;酶联免疫吸附试验检测脊髓组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平;Western bloting检测脊髓组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、P2X7蛋白的表达.结果 转染组miR-124相对表达量高于空白组(P<0.05).与假手术组、ASCI组比较,实验组脊髓组织miR-124相对表达量升高(P<0.05).与假手术组比较,ASCI组脊髓组织Iba-1+/CD32+、Iba-1+/CD206+占比均升高(P<0.05);与ASCI组比较,实验组脊髓组织Iba-1+/CD32+占比降低(P<0.05),Iba-1+/CD206+占比升高(P<0.05).与假手术组比较,ASCI组脊髓组织TNF-α、IL-6、IL-8升高(P<0.05);与ASCI组比较,实验组脊髓组织TNF-α、IL-6、IL-8降低(P<0.05).与假手术组比较,ASCI组脊髓组织NLRP3、Caspase-1、P2X7蛋白相对表达量升高(P<0.05);与ASCI组比较,实验组脊髓组织NLRP3、Caspase-1、P2X7蛋白相对表达量降低(P<0.05).结论 Exos源性miR-124可促进ASCI大鼠脊髓M1型MG转化为M2型,减轻炎症反应,推测其作用机制与抑制P2X7-NLRP3/Caspase-1信号通路活性有关.
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