摘要
目的 探究microRNA-137(miR-137)通过Wnt信号通路对人宫颈癌细胞HeLa的增殖与凋亡,以及对裸鼠移植瘤的作用.方法 将人宫颈癌细胞HeLa分别转染miR-137-mimic质粒(miR-137组)和空载质粒(NC组),另设空白组只加入等量转染试剂不做其他处理.待细胞稳定转染后,采用CCK-8法检测细胞活性.采用流式细胞仪检测细胞凋亡.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Wnt、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)、miR-137 mRNA相对表达量;采用Western blotting检测Wnt、MMP-7、DKK1蛋白的相对表达量.将稳定转染的细胞接种于裸鼠背部,观察裸鼠移植瘤的生长情况,绘制生长曲线并计算抑瘤率.结果 空白组、NC组、miR-137组12 h、24 h、48 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点的OD值有差异(P<0.05);②3组的OD值有差异(P<0.05),miR-137组OD值较空白组和NC组低,相对细胞活性较低;③3组OD值的变化趋势有差异(P<0.05).miR-137组细胞凋亡率高于空白组和NC组(P<0.05).miR-137组细胞Wnt和MMP-7 mRNA相对表达量较空白组和NC组降低(P<0.05);miR-137组细胞DKK1和miR-137 mRNA相对表达量较空白组和NC组升高(P<0.05).miR-137组细胞Wnt、MMP-7蛋白相对表达量较空白组和NC组降低(P<0.05);miR-137组细胞DKK1蛋白相对表达量较空白组和NC组升高(P<0.05).NC组裸鼠移植瘤的抑瘤率与miR-137组比较,差异有统计学意义(P<0.05),miR-137组裸鼠移植瘤的抑瘤率增加.空白组、NC组、miR-137组裸鼠不同时间点的肿瘤体积比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点的肿瘤体积有差异(P<0.05);②3组的肿瘤体积有差异(P<0.05),miR-137组与空白组和NC组相比,肿瘤生长缓慢,相对抑瘤效果较好;③3组肿瘤体积的变化趋势有差异(P<0.05).结论 在人宫颈癌细胞中过表达miR-137可以促进癌细胞凋亡,抑制癌细胞增殖,该作用可能与Wnt及其上下游MMP-7/DKK1信号通路有关.
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