摘要
目的 探究氯化两面针碱促进骨髓瘤细胞凋亡的机制.方法 将人多发性骨髓瘤(MM)细胞株RPMI 8226培养至对数生长期,采用CCK-8法检测细胞活性并测定半数抑制浓度(IC50).将MM细胞株RPMI 8226随机分为空白组、硼替佐米(BTZ)组、氯化两面针碱(NCe)组和BTZ+NCe组.BTZ组加入500μL 10 nmol/L BTZ溶液,参照IC50在NCe组加入500μL 4.5μmol/L NCe,BTZ+NCe组加入250μL 10 nmol/L BTZ和250μL 4.5μmol/L NCe,继续培养24 h.采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting检测各组细胞STK4、YAP1、Cl-caspase-3 mRNA和蛋白的表达.结果 与空白孔相比,其余各孔的细胞存活率均降低(P<0.05);与0μmol/L NCe孔比较,1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L NCe孔的细胞存活率均降低(P<0.05).孵育24 h的IC50为(4.56±0.64)μmol/L.与空白组比较,BTZ组、NCe组及BTZ+NCe组细胞凋亡率升高(P<0.05).与空白组比较,BTZ组、NCe组及BTZ+NCe组STK4 mRNA和蛋白相对表达量降低(P<0.05),YAP1和Cl-caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05).结论 氯化两面针碱可以抑制骨髓瘤细胞增殖,促进其凋亡,该作用可能通过抑制STK4/YAP1通路来实现.
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