摘要
目的 探讨妊娠糖尿病(GDM)患者血清microRNA-21(miR-21)表达变化及其对滋养层细胞生物学行为的作用机制.方法 选取2019年1月—2020年10月三亚市妇幼保健院收治的66例GDM孕妇及同期体检且孕周相近的38例健康孕妇作为研究对象.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清miR-21 mRNA表达水平,microRNA转染JAR细胞系构建Control、miR-21 NC、miR-21、miR-21 inhibitor NC和miR-21 inhibitor组细胞.采用CCK-8法检测细胞活力,Brdu检测细胞增殖,Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭,TUNEL法检测细胞凋亡;采用Western blotting检测Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase 9、E-cadherin及Vimentin蛋白表达.结果 研究组患者miR-21 mRNA相对表达量及FPG、HbA1c水平较对照组高(P＜0.05).miR-21组细胞miR-21 mRNA相对表达量高于Control组(P＜0.05),miR-21 inhibitor组细胞 mRNA相对表达量低于Control组(P＜0.05).CCK-8法检测结果显示,miR-21组细胞活力较Control组下调(P＜0.05),miR-21 inhibitor组细胞活力较Control组上升(P＜0.05).miR-21组细胞增殖能力较Control组减弱(P＜0.05),miR-21 inhibitor组细胞增殖能力较Control组增强(P＜0.05).miR-21组细胞凋亡率较Control组升高(P＜0.05),miR-21 inhibitor组细胞凋亡率较Control组降低(P＜0.05).miR-21组的穿膜细胞数低于Control组(P＜0.05),miR-21 inhibitor组的穿膜细胞数高于Control组(P＜0.05).相较于Control组,miR-21组E-cadherin表达上调,Vimentin表达下调(P＜0.05),miR-21 inhibitor组E-cadherin表达下调,Vimentin表达上调(P＜0.05).相较于Control组,miR-21组Cleaved Caspased-9、Bax蛋白相对表达量上升,Bcl-2蛋白相对表达量下降(P＜0.05);miR-21 inhibitor组Caspased-9、Bax蛋白相对表达量下降,Bcl-2蛋白相对表达量上升(P＜0.05).结论 GDM孕妇存在miR-21高表达,miR-21可通过调节Bcl-2/Caspase-9介导对滋养层细胞增殖、侵袭的抑制作用,继而促进细胞凋亡.
基金项目
海南省自然科学基金(821MS0847)
海南省临床医学中心建设项目(琼卫医函202175号)
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