摘要
目的 探讨胃癌来源的间充质干细胞(GCMSC)促进胃癌细胞程序性死亡配体1(PD-L1)表达的具体特征,为进一步研究GCMSC促进肿瘤细胞PD-L1表达机制及胃癌的靶向治疗提供依据.方法 采用细胞贴壁法从胃癌组织中分离出GCMSC,流式细胞仪分析GCMSC表面标志物,采用成脂和成骨分化实验评价GCMSC的多向分化能力.流式细胞术分选PD-L1阴性和PD-L1阳性胃癌细胞.收集GCMSC条件培养基(GCMSC-CM)处理胃癌细胞,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting检测胃癌细胞PD-L1的mRNA和蛋白表达.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胃癌患者血清游离PD-L1和白细胞介素-8(IL-8)水平.结果 成功分离鉴定GCMSC,结果发现GCMSC-CM处理24、48和72 h后,SGC-7901细胞的PD-L1表达均上调(P<0.05),GCMSC-CM处理MGC-803细胞 24、48和72 h后,MGC-803细胞PD-L1表达也上调(P<0.05).然而,去除GCMSC-CM后48 h,SGC-7901和MGC-803的PD-L1表达又逐渐恢复.当IL-6或IL-8在GCMSC-CM中被阻断时,与GCMSC-CM组比较,这种促进作用被逆转,尤其是IL-8的作用更明显(P<0.05).胃癌患者血清游离PD-L1与IL-8呈正相关(r =0.347,P<0.05).流式细胞术结果显示,经GCMSC-CM再次处理后,PD-L1阳性胃癌细胞PD-L1表达能够再次升高(P<0.05),而PD-L1阴性的胃癌细胞PD-L1的表达仍然不升高(P>0.05).结论 GCMSC-CM促进胃癌细胞中PD-L1表达,并依赖GCMSC-CM的持续作用.胃癌细胞具有异质性,其PD-L1表达对GCMSC具有不同的反应性.
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