[目的]制备猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)灭活病毒包被的微胶囊,并评价其对新生仔猪口服黏膜免疫效果,以预防TGEV引起严重腹泻和造成经济损失.[方法]采用一步法以海藻酸钠和壳聚糖为微胶囊壁材,以灭活的TGEV为抗原制备TGEV微胶囊疫苗.以包封率、蛋白载量、体外释放速率为微胶囊质量评价指标,分别从成囊材料的配比及不同盐水溶液对微胶囊性能的影响方面对TGEV微胶囊的制备进行筛选,并评价TGEV微胶囊在不同环境的释放速率和室温储存耐受性.最后进行免疫学分析,对仔猪进行口服免疫,测定各项免疫指标,开展抗体效价检测和病毒中和试验.[结果]筛选出的制备微胶囊的最佳工艺条件为:海藻酸钠浓度1.5％,壳聚糖浓度1.2％,氯化钙浓度3.5％,灭活病毒抗原加入量为1～2 mL,在此工艺条件下制备的TGEV微胶囊在PBS和盐水溶液中第3天释放率均超过50％;第18天,释放率分别达到97％和88％.常温放置5个月最低释放率仍保持在80％以上.口服免疫仔猪,微胶囊高、低剂量组粪便样品中IgA抗体的D490nm值分别为0.97和1.49,IgG的抗体的D490nm值分别为1.03和1.75.病毒中和试验中,微胶囊高、低剂量组抗体IgG的病毒50％中和效价分别为1∶512和1∶256;微胶囊高、低剂量组抗体IgA的病毒50％中和效价分别为1∶128和1∶64.[结论]海藻酸钠-壳聚糖微胶囊不仅具有在肠道中释放灭活的TGEV抗原的缓释效果,且对于疫苗免疫具有佐剂辅助效果,可增加适应性黏膜免疫应答中的抗体效价,在肠道中释放灭活的TGEV可有效刺激黏膜和全身免疫反应.
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