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PS-MPs和DEHP联合暴露通过NO/iNOS/NF-κB通路诱导小鼠结肠上皮细胞自噬的作用机制研究

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[目的]探究聚苯乙烯微塑料(PS-MPs)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)联合暴露通过NO/iNOS/NF-κB通路诱导小鼠结肠上皮细胞(MCEC)自噬的作用机制。[方法]依据CCK-8法测定的PS-MPs和DEHP对MCEC的半数抑制浓度(IC50),将MCEC分为5组:对照组、PS-MPs组、DEHP组、联合组和抑制组,各组 MCEC 分别用培养基及含有 200 μg/L PS-MPs、100 μmol/L DEHP、200 μg/L PS-MPs+100 μmol/L DEHP、200 μg/L PS-MPs+100 μmol/L DEHP+5 nmol/L硼替佐米(PS-341)的培养基处理24 h后,采用生化试剂盒检测NO含量及iNOS活性,通过MDC法检测自噬小体,利用免疫荧光染色、实时荧光定量PCR和Western blotting检测自噬,以及NO/iNOS/NF-κB通路相关基因的mRNA和蛋白表达水平。[结果]PS-MPs和DEHP均可抑制MCEC的活力,且IC50分别为2 315 μg/L和1 477 μmol/L。与对照组相比,PS-MPs、DEHP、联合组细胞中NO含量、iNOS活性及NO/iNOS/NF-κB通路相关基因的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0。05),MDC法与免疫荧光染色的荧光强度均显著增强(P<0。05),MCEC的自噬相关基因(Beclin1、ATG5、LC3-B)的mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0。05);PS-341可显著缓解PS-MPs和DEHP对MCEC暴露引起的上述检测指标的变化。[结论]联合暴露于PS-MPs和DEHP可激活iNOS,使NO含量激增,上调NO/iNOS/NF-κB通路,从而诱导小鼠结肠上皮细胞自噬。

艾婧竹、徐世文

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东北农业大学动物医学学院,哈尔滨 150000

聚苯乙烯微塑料(PS-MPs) 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP) NO/iNOS/NF-κB通路 小鼠结肠上皮细胞(MCEC) 自噬

黑龙江省自然科学基金重点项目

ZD2023C002

2024

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中国畜牧兽医
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

中国畜牧兽医

CSTPCD北大核心
影响因子:0.72
ISSN:1671-7236
年,卷(期):2024.51(11)
艾婧竹,徐世文.PS-MPs和DEHP联合暴露通过NO/iNOS/NF-κB通路诱导小鼠结肠上皮细胞自噬的作用机制研究[J].中国畜牧兽医,2024,51(11):4678-4689.DOI:10.16431/j.cnki.1671-7236.2024.11.003.