基于Nrf2/HO-1信号通路的夜关门提取物对谷氨酸诱导小鼠海马细胞HT22损伤的保护作用及机制研究

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中文摘要：目的:基于核因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路研究夜关门提取物对谷氨酸诱导小鼠海马细胞HT22损伤的保护作用及机制.方法:采用谷氨酸(5 mmol/L)建立HT22细胞损伤模型后,以水溶性维生素E为阳性对照(50µmol/L),采用MTT法检测0(空白对照)、25、50、100µg/mL夜关门的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯提取物预处理12 h后对谷氨酸诱导损伤细胞增殖的影响.以水溶性维生素E为阳性对照(50µmol/L),采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐探针(DCFH-DA)法检测0(空白对照)、25、50、100µg/mL夜关门二氯甲烷提取物预处理12 h后对谷氨酸诱导损伤细胞中活性氧(ROS)水平的影响;以HO-1激动剂钴-原卟啉为阳性对照,采用Western blotting法检测0(空白对照)、25、50、100µg/mL夜关门二氯甲烷提取物处理24 h后对细胞中HO-1蛋白表达的影响;分别采用Western blotting法(药物分别处理0.5、1、1.5 h)和免疫荧光染色法(药物处理1 h)检测100µg/mL夜关门二氯甲烷提取物处理后对细胞核内外Nrf2蛋白表达的影响.采用小干扰RNA(si-RNA)转染技术进行HO-1基因沉默后,考察100µg/mL夜关门二氯甲烷提取物对谷氨酸诱导损伤细胞的存活率以及细胞中ROS水平的影响.结果:与空白对照比较,50、100µg/mL夜关门二氯甲烷提取物均可显著升高细胞的存活率(P<0.05),并降低细胞中ROS水平(P<0.05);25、50、100µg/mL夜关门二氯甲烷提取物均可显著升高细胞中HO-1蛋白表达水平(P<0.05),100µg/mL夜关门二氯甲烷提取物可显著降低细胞质中Nrf2蛋白水平并升高细胞核中Nrf2蛋白水平(P<0.05).HO-1基因沉默后,夜关门二氯甲烷提取物对谷氨酸诱导损伤细胞的促增殖以及降低ROS水平的作用被逆转(P<0.05).结论:夜关门二氯甲烷提取物可通过激活Nrf2信号通路,诱导HO-1蛋白的表达,从而发挥对谷氨酸诱导损伤HT22细胞的保护作用.

外文标题：Study on Protective Effects and Mechanism of Lespedeza cuneata Extracts on Glutamate-induced Hippocampal Cells HT22 Injury of Mice Based on Nrf2/HO-1 Signaling Pathway

作者：

郭丰、黄山、李斌

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作者单位：

白城医学高等专科学校药学系,吉林白城 137000

青岛科技大学药学系,山东青岛 266000

关键词：

夜关门谷氨酸血红素加氧酶1 核因子2 小鼠海马细胞HT22 机制

基金：

国家自然科学基金资助项目国家自然科学基金资助项目国家自然科学基金资助项目

项目编号：

817607793150028881360686

出版年：

2020

中国药房

中国医院协会,中国药房杂志社

中国药房

CSTPCD北大核心

影响因子：0.956

ISSN：1001-0408

年,卷(期)：2020.31(11)

被引量1
参考文献量7