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苦参碱对乙醛活化的肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响及机制研究

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目的:研究苦参碱对乙醛活化的大鼠肝星状细胞CFSC-8B增殖和胶原合成的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:取体外培养的CFSC-8B细胞,分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5μmol/L秋水仙碱)和苦参碱低、中、高浓度组(30、60、120μmol/L).除空白对照组外,其余各组细胞均加入200μmol/L乙醛溶液诱导活化,并同时加入相应药液(空白对照组和模型组加入等体积空白培养液),共同作用24 h后,采用CCK-8法检测各组细胞的存活率.另取细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5μmol/L秋水仙碱)和苦参碱中、高浓度组(60、120μmol/L),同法活化和加药处理.分别采用酶消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸(Hyp)含量;采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)含量;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测细胞中α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、TGF-β1Ⅰ型受体(TβR-Ⅰ)、TGF-β1Ⅱ型受体(TβR-Ⅱ)、Smad3、Smad4和Smad7 mRNA表达水平;采用Western blotting法检测细胞中α-SMA、TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,模型组细胞存活率显著升高(P<0.05);细胞培养液中Hyp、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ含量和细胞中α-SMA、TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad3和Smad4 mRNA及其蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),细胞中Smad7 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).与模型组比较,阳性对照组和苦参碱中、高浓度组细胞存活率和细胞培养液中Hyp、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ含量以及细胞中α-SMA、Smad4 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),细胞中Smad7 mRNA及其蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);阳性对照组和苦参碱高浓度组细胞中TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad3 mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).与苦参碱中浓度组比较,苦参碱高浓度组细胞各指标水平改善程度均更显著(P<0.05).结论:苦参碱能抑制乙醛活化的CFSC-8B细胞的增殖和胶原合成,且具有一定的浓度依赖性;其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路的传导有关.
Study on the Effects and Mechanism of Matrine on Proliferation and Collagen Synthesis of Hepatic Stellate Cells CFSC-8B Activated by Acetaldehyde

王晓丽

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齐齐哈尔医学院药学院,黑龙江齐齐哈尔 161006

苦参碱 肝星状细胞 增殖 胶原合成 转化生长因子β1/Smad通路 机制

黑龙江省自然科学基金面上项目黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目

H20160982018-KYY-WF-0099

2020

中国药房
中国医院协会,中国药房杂志社

中国药房

CSTPCD北大核心
影响因子:0.956
ISSN:1001-0408
年,卷(期):2020.31(11)
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