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岭南山竹子醇提物对LPS致RAW264.7细胞炎性损伤的保护作用研究

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目的:探讨岭南山竹子70％乙醇提取物(GOEE)对脂多糖(LPS)致RAW264.7细胞炎性损伤的保护作用及其潜在分子机制.方法:取岭南山竹子果皮用70％乙醇回流提取,制得GOEE.采用Folin-Ciocalteau法和紫外-可见分光光度法分别测定GOEE中总多酚和总黄酮的含量.采用MTT法检测不同剂量GOEE的细胞毒性;以LPS诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立炎症模型,分别以地塞米松、N-乙酰基-L-半胱氨酸为阳性对照,采用Griess法和2′,7′-二氯荧光素法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)和细胞中活性氧(ROS)的含量;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平;采用Western blotting法测定细胞中p65蛋白(p65)、磷酸化p65(p-p65)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)、血红素加氧酶-1(HO-1)以及细胞核内核因子E2相关因子2(NRF2)蛋白的表达水平.结果:GOEE中总多酚与总黄酮的含量分别为(20.191±1.264)、(12.571±0.020)mg/g.当剂量≤500μg/mL时,GOEE对RAW264.7细胞存活率无显著影响(P>0.05).与对照组比较,LPS模型组NO、ROS含量,TNF-α、IL-6、IL-1β水平,p-p65/p65和p-IκBα/IκBα比值以及NRF2蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01).与LPS模型组比较,阳性对照组和GOEE各处理组细胞NO(除GOEE 50μg/mL处理组外)、ROS含量,TNF-α、IL-6、IL-1β水平以及p-p65/p65和p-IκBα/IκBα比值均显著降低,HO-1、NRF2蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01).结论:GOEE可通过抑制炎症反应、抑制核因子κB通路磷酸化、促进NRF2蛋白入核等途径来减轻LPS诱导的小鼠巨噬细胞炎性损伤.
Study on Protective Effects of the Ethanol Extract of Garcinia oblongifolia on LPS-induced RAW264.7 Cell Inflammatory Injury

黄雷、刘美琼、张小曼、苏少锋、邹小琴、钟小斌、冯洁

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广西医科大学附属埌东医院药学部,南宁 530029

广西医科大学药学院中药学教研室,南宁 530021

广西医科大学第一附属医院科研部,南宁530021

岭南山竹子 果皮 醇提物 抗炎作用 核因子κB 核因子E2相关因子2 小鼠巨噬细胞 RAW264.7

广西自然科学基金资助项目南宁市青秀区科技计划项目

2018GXNSFAA-2940432019025

2020

中国药房
中国医院协会,中国药房杂志社

中国药房

CSTPCD北大核心
影响因子：0.956
ISSN：1001-0408
年,卷(期)：2020.31(14)
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