摘要
为克隆和原核表达安氏隐孢子虫囊壁蛋白(COWP)的部分编码基因(AB),本研究根据COWP基因序列设计引物,RT-PCR扩增目的基因AB,从而构建重组原核表达质粒pET-AB.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE以及western blot鉴定.回收并纯化重组蛋白,免疫BALB/c小鼠,检测细胞免疫和体液免疫水平.SDS-PAGE和western blot分析显示,重组蛋白约为16 ku,可以被HRP标记的抗组氨酸抗体和安氏隐孢子虫免疫的小鼠血清识别.经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠抗体水平以及CD4+和CD8+的值均差异显著(P<0.05),表明获得的重组蛋白具有一定的免疫原性.
基金项目
国家科技支撑计划农业领域项目(2007BAD40B05)