目的:探讨黄连原液降低耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性的作用机理.方法:将10株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌USA 300根据黄连原液浓度不同,分为黄连原液50.00μg·mL-1组、25.00μg·mL-1组、12.25μg·mL-1组、6.25μg·mL-1组、3.12μg·mL-1组、1.56μg·mL-1组、0.78μg·mL-1组、0.39μg·mL-1组,同时设阴性对照(只含营养肉汤管).使用结晶紫法、Western blot、CCK-8法和RT-qPCR法检测黄连原液通过清除、抑制USA 300生物膜形成所发挥的抑菌作用.结果:黄连原液抑制USA 300的最小抑菌浓度(MIC)为6.25μg·mL-1;随着黄连原液浓度的增加,黄连原液对USA 300的抑制率、清除率、抑菌圈、逆转率均升高,相关基因和蛋白表达均降低.结论:黄连原液通过抑制USA 300生物膜形成、抑制生物膜icaA、atlE、aap、agrA和stk蛋白及mRNA的表达,加大对USA 300生物膜的清除率和抑制USA 300的活性,降低USA 300的耐药性.
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