首页|基于CFTR的胞浆内第二信使cAMP检测方法的建立

基于CFTR的胞浆内第二信使cAMP检测方法的建立

扫码查看
原文链接
  • 万方数据
  • 维普
目的:建立一种基于CFTR可敏感检测胞浆内第二信使cAMP的检测方法.方法:构建CFTR和YFP-H148Q/I152L真核表达载体,应用脂质体转染法构建共表达CFTR和YFP-H148Q/I152L的FRT细胞,倒置荧光显微镜观察其表达情况,流式细胞仪检测细胞纯度;荧光淬灭动力学实验验证细胞模型的有效性;荧光淬灭动力学实验验证细胞模型可筛选CFTR调节剂;放射免疫法检测加入CFTR激活剂后细胞内的cAMP浓度.结果:倒置荧光显微镜下观察到CFTR表达在细胞膜上,YFP-H148Q/I152L表达于胞浆中;成功构建共表达CFTR和YFP-H148Q/I152L的FRT细胞模型;荧光变化斜率值与CFTR调节剂浓度成剂量依赖关系,该模型可筛选CFTR调节剂;荧光变化斜率值可反映胞浆内cAMP浓度,该模型可敏感检测胞浆内cAMP浓度.结论:此细胞模型可以高效敏感检测胞浆内第二信使cAMP浓度,为cAMP信号相关靶点的研究提供一种简便快捷的方法.
Establishment of a CFTR-based detection method for the second messenger cAMP in the cytoplasm

吴明达、刘雪莹、冯剑南、高雪伟、郝峰、高俊涛

展开 >

吉林医药学院检验学院,吉林 132013

延边大学医学院,延吉 133002

北华大学医学技术学院,吉林 132013

吉林医药学院基础医学院,吉林 132013

展开 >

囊性纤维化跨膜传导调节因子 细胞模型 第二信使 cAMP浓度

国家自然科学基金吉林省教育厅基金吉林省卫生与健康技术创新项目吉林省科技发展计划吉林省科技发展计划吉林省教育厅课题

81601234JJKH20170418KJ2018J11320210101239JC20191102060YYJJKH20220462KJ

2022

10.12047/j.cjap.6208.2022.015

中国应用生理学杂志
中国生理学会,军事医学科学院,卫生学环境医学研究所

中国应用生理学杂志

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.805
ISSN：1000-6834
年,卷(期)：2022.38(1)
  • 3