实时荧光定量PCR法检测外源性DNA在重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的残留

Detection of exogenous DNA residues in recombinant type Ⅲ humanized collagen lyophilized fibers by real-time fluorescence quantitative PCR

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中文摘要：目的对实时荧光定量PCR(qPCR)法检测重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的外源性DNA残留量进行探究和分析,确定该方法用于DNA质量控制的可行性.方法采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒(磁珠法)提取DNA,利用E.coli残留DNA检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行扩增反应,绘制标准曲线,建立重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的qPCR检测方法.结果对8批重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维进行测定,外源性DNA残留量在0.03～300 pg/μl内,重复性良好,均远低于每剂10 ng,线性良好(R2>0.99),回收率均在50％～150％之间.结论该方法可用于重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的定量测定.

作者：

梁凯歌、孙丹丹

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作者单位：

030000 太原,山西锦波生物医药股份有限公司功能蛋白山西省重点实验室

关键词：

实时荧光定量PCR 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维外源性DNA残留

出版年：

2023

DOI：

10.3969/j.issn.1673-713X.2023.01.006

中国医药生物技术