目的:研究并建立针对抗白细胞分化抗原19(Cluster of Differentiation 19,CD19)单抗的关键质量属性质控方法.方法:运用肽图对抗CD19的单抗进行鉴别;采用还原/非还原十二烷基磺酸钠毛细管电泳(Capillary Electrophoresis-sodium Dodecyl sulfonate,CE-SDS)和分子排阻色谱(Size Exclusion-High Performance Liquidchromatography,SEC-HPLC)进行单抗纯度的控制;运用成像毛细管等电聚焦电泳(Imaging Capillary Isoelectricfocusing Electrophoresis,iCIEF)测定电荷异质性;运用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)分析抗CD19单抗的糖基化,采用基于报告基因的抗体依赖的细胞介导的细胞毒效应(Antibody-Dependent Cell-mediated Cytotoxicity,ADCC)测定生物学活性.其他各项指标均应符合现行版《中华人民共和国药典》以及其他相关要求.结果:肽图检测抗CD19单抗具有相应的特征图谱,能够用于鉴别;还原CE-SDS的轻链与重链峰面积之和百分比为(98.77±0.05)％;非还原CE-SDS主峰峰面积百分比为(96.19±0.05)％,片段百分比为(3.81±0.05)％;SEC-HPLC单体的峰面积百分比为(99.42±0.001)％,聚合物峰面积百分比为(0.54±0.001)％;iCIEF分析的主要亚型的峰面积百分比为(66.41±0.38)％,酸性亚型的峰面积百分比为(13.69±0.16)％,碱性亚型的峰面积百分比为(19.90±0.46)％;在糖型分析中,占比最高的三个糖型分别为G0、G0-GN和M5,G0的含量为(64.64±0.61)％,G0-GN的含量为(9.75±0.42)％,M5含量为(6.22±0.35)％,生物学活性的半数最大效应浓度(Concentration for 50％of Maximal Effect,EC50)值为(10.09±1.40)ng·mL-1.结论:针对抗CD19单抗的关键质量属性,研究并建立了相应的质量控制方法,以确保其安全、有效和质量可控,为该类单抗产品的质量控制方法和策略提供参考依据.
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