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微小RNA-15b在胰腺癌中的表达及增殖、迁移、凋亡功能研究

Function of microRNA-15b in proliferation, migration and apoptosis of pancreatic cancer cells

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目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-15b在胰腺癌(PC)的表达及其对胰腺癌细胞株增殖、迁移、凋亡的影响.方法 实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-15b在4种购自中国科学院细胞库的胰腺癌细胞株[SW1990、人胰腺癌细胞株(CFPAC-1)、PANC-1、BxPC-3]和购自美国ATCC细胞库的人正常胰腺导管上皮细胞细胞株(HPDE6c7)的表达量.将稳定转染miR-15b短发卡RNA (shRNA)的CFPAC-1、PANC-1作为实验组,以转染阴性对照(NC)正常表达miR-15b的CFPAC-1、PANC-1作为对照组.转染后细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验检测CFPAC-1、PANC-1的增殖能力;Transwell迁移实验检测CFPAC-1、PANC-1的迁移能力;流式细胞术检测CFPAC-1、PANC-1的凋亡率.应用SPSS 19.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,多组资料间比较使用单因素方差分析和LSD-t检验,计数资料采用率值表示,组间比较采用x2检验.结果 miR-15b在4株胰腺癌细胞株(SW1990、CFPAC-1、PANC-1、BxPC-3)的表达量(3.63±1.02、5.28±0.76、6.72±1.39、4.68±1.56)较HPDE6c7的表达量(1.08±0.23)明显增高,差异有统计学意义(=9.944、10.326、12.013、15.877,P<0.01).低表达miR-15b组的CFPAC-1在2、3、4d细胞增殖能力shRNA(0.51±0.04、0.94±0.06、1.25±0.15)比对照组的CFPAC-1(0.68±0.06、1.21±0.09、1.95±0.12)显著下降,差异有统计学意义(t=8.256、6.350、7.002,P<0.05);低表达miR-15b组的PANC-1在2、3、4d细胞增殖能力shRNA(0.48±0.05、0.76±0.13、1.44±0.25)比对照组的PANC-1 (0.58±0.07、0.98±0.13、1.86±0.14)显著下降,差异有统计学意义(t=9.988、10.022、13.050,P< 0.01).低表达miR-15b组的CFPAC-1、PANC-1穿过Transwell小室的细胞数量[(38.47±4.69)个、(47.83±12.47)个]比对照组细胞数[(62.39±7.39)个、(68.97±8.44)个]明显减少,差异有统计学意义(=5.798、8.465,P<0.05).低表达miR-15b组CFPAC-1、PANC-1细胞凋亡率[(14.68±3.21)%、(11.57±2.52)%]较对照组细胞凋亡率[(4.29±1.42)%、(4.73±0.38)%]明显增高,差异有统计学意义(扛6.350、8.669,P<0.05).结论 miR-15b在PC细胞中高表达,低表达miR-15b会降低PC细胞的增殖和迁移能力,促进PC细胞凋亡.

刘传江、夏鹏、刘攀、周文婧、付强、秦涛、张宏伟

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郑州大学人民医院河南省人民医院肝胆胰腺外科 450003

郑州大学人民医院河南省人民医院心理医学科 450003

微小RNA-15b 增殖 迁移 凋亡

国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划联合共建项目

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2020

中华实验外科杂志
中华医学会

中华实验外科杂志

CSTPCD北大核心
影响因子:0.759
ISSN:1001-9030
年,卷(期):2020.37(1)
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