目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-155对骨肉瘤细胞生长的影响及其作用机制.方法 正常成骨细胞作为对照组,骨肉瘤细胞作为实验组.实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测骨肉瘤细胞株(n=4)中miRNA的表达量.细胞计数试剂盒(CCK-8)法和蛋白质印迹法(Western blot)观察miRNA对骨肉瘤细胞增殖生存能力的影响和调节机制.两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 Real-time PCR结果显示,miR-155在骨肉瘤细胞株U2OS,Saos-2和MG-63中的表达量分别为5.10 ±0.32、6.82 ±0.48及10.12 ±0.39,显著高于其对照组正常成骨细胞hFOB1.19的表达量(1.01 ±0.13,t=13.1000,P＜0.01),差异有统计学意义;CCK-8结果表明,与阴性对照组(0.37±0.02、0.58±0.02、0.80±0.04)比较,在转染miR-155后48、72、96 h,MG-63细胞的A值分别是0.49-±0.03、0.77 ±0.03、0.93±0.02,其增殖能力明显增强(t=11.200,P＜0.05),差异有统计学意义;流式细胞术检测结果表明,过表达miR-155组中MG-63的凋亡率为(0.90±0.13)％,明显低于阴性对照组中的凋亡率[(5.92±0.80)％,t=17.900,P＜0.05],差异有统计学意义;此外,通过靶基因预测软件、结合Western blot显示miR-155可能通过转录后水平调节MAP3K10的表达.结论 miR-155在骨肉瘤组织中高表达且可促进骨肉瘤细胞的增殖.
NETL
NSTL
维普
万方数据
