目的 本研究通过HaCaT细胞体外研究观察不同浓度(包括生理浓度)维生素D3(VD3)对表皮细胞迁移的影响并初步探索其迁移调控机制.方法 选用不同浓度VD3 (0 nmol/L、102 nmol/L、10 nmol/L、10-1 nmoL/L、10-3 nmol/L及10-5 nmol/L)的处理HaCaT细胞(上海中国科学院细胞研究所)后,通过划痕实验、活细胞工作站实验、免疫荧光染色实验和免疫印迹实验观察HaCaT细胞迁移运动和检测α-微管蛋白(α-tubulin)的表达并通过t检验评估组间差异,研究其迁移调控机制.结果 与对照组比较(VD3浓度0 nmol/L),高浓度VD3组(102、10 nmol/L) HaCaT细胞呈现出更小的迁移范围和速率,α-tubulin表达增高(53.650±5.414和65.370±4.512比76.110±4.386,t =3.224、2.357,P＜0.05;29.140±0.678比32.780±1.311,t=2.467,P＜0.05;18.070±0.792和16.830±1.028比14.830±0.741,t=3.254、2.336,P＜ 0.05).生理浓度VD3组(10-1nmol/L) HaCaT细胞表现为更大的迁移范围和速率,α-tubulin表达降低(87.010±1.936比76.110±4.386,t =2.274,P ＜0.05;41.210±2.044比32.780±1.311,t=3.472,P ＜0.05;11.350±0.691比14.830 ±0.741,t=3.425,P＜0.05).低浓度VD3组(10-3、10-5 nmol/L) HaCaT细胞迁移的范围、速率和α-tubulin表达与对照组比较差异无统计学意义(79.360±6.036和72.370±2.990比76.110 ±4.386,t =0.298、0.687,P ＞0.05;34.150±1.588和33.240±1.055比32.780±1.311,t=0.666、0.289,P＞0.05;14.310±1.115比14.830 ±0.741,=0.403,P＞0.05).结论 VD3通过微管动力学来调控表皮细胞的迁移,其作用具有双相性和浓度选择性.该研究为进一步揭示局部皮肤VD3应用浓度对伤口愈合作用的细胞和分子机制提供基础.
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