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沉默载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B基因对人胰腺癌SW1990细胞的影响

Effect of silencing apolipoprotein B mRNA editing enzyme complex 3B gene on human pancreatic cancer SW1990 cells

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目的 观察沉默载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B(APOBEC3B)基因对胰腺癌细胞PATU8988(购自美国典型菌种保藏中心)细胞周期、增殖及侵袭能力的影响.方法 通过构建重组靶向干扰APOBEC3B基因的短发卡RNA (shRNA)慢病毒表达质粒PGC-shRNA-APOBEC3B沉默APOBEC3B基因.分为空白对照组、阴性对照组及转染组.实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞APOBEC3B基因和蛋白的表达变化;流式细胞仪检测细胞周期的变化;平板克隆实验检测细胞增殖;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭力.组间比较采用单因素方差分析和LSD-t检验.结果 APOBEC3B基因和蛋白表达空白对照组为2.28±0.27和3.51±0.32,阴性对照组为2.32±0.21和3.33±0.29,转染组(0.26±0.09和0.31±0.12)明显低于上述两组(t=6.230、5.640,P＜0.01);细胞周期结果显示G0/G1期与S期细胞空白对照组为(55.16±4.19)％、(31.21±1.92)％,阴性对照组为(52.35±3.53)％、(32.17±4.21)％,转染组为(75.12±5.34)％、(13.55±2.01)％,细胞周期阻止于G0/G1期(t=5.230,P＜0.01),S期细胞数减少(t=5.830,P＜0.01);平板克隆实验显示转染组细胞克隆形成数[(135.77±12.14)个]明显低于空白对照组和阴性对照组[(254.00±12.31)、(247.00±14.51)个,t=11.210,P＜0.01];穿膜细胞数转染组[(92.41±18.42)个]明显低于空白对照组和阴性对照组[(215.00±23.83)、(227.00±21.25)个,=6.480,P＜0.01].结论 APOBEC3B基因沉默显著抑制SW1990细胞的增殖,减少S期细胞,降低细胞侵袭能力.

陈雪姣、李昊、张宏伟、仓顺东、唐强

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河南省人民医院肿瘤内科,郑州 450003

河南省人民医院肝胆胰腺外科,郑州450003

载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B 胰腺癌 细胞周期 脱噬作用 侵袭

河南省科技攻关项目

202102310444

2020

10.3760/cma.j.cn421213-20191111-01479

中华实验外科杂志
中华医学会

中华实验外科杂志

CSTPCD北大核心
影响因子：0.759
ISSN：1001-9030
年,卷(期)：2020.37(5)
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