目的 探讨和建立稳定的大鼠股骨干骺端内H型微血管的观测方法.方法 2019年3月至2019年9月,15只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠,购自南方医科大学动物实验中心,简单随机抽样分5组:25 μm组(A组),50 μm组(B组),70μm组(C组),100 μm组(D组),150 μm组(E组).取后肢股骨,经固定、脱钙、脱水、包埋等,形成5组厚切片,免疫荧光特异性标记CD31显示微血管,比较不同厚度下股骨干骺端内微血管网血管平均面积占比、节点数目、血管总长度等指标,确立最佳观测厚度,在此基础上,CD31和Emcn双染观测H型微血管情况.应用Angio Tool软件分析骨内微血管网指标,SPSS 17.0软件行统计分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用方差分析,两两比较采用最小显著性差异法(LSD)分析.结果 A～E组5组血管平均面积占比分别为(20.6±1.6)％、(31.0±1.4)％、(45.9±0.8)％、(31.8±1.1)％、(20.9±0.7)％,C组平均面积占比明显高于其余4组(F=313.642,P＜0.01),差异有统计学意义.A～E组5组节点数目分别为(103 ±6)、(175±6)、(305±5)、(151±6)、(45±3)个,C组节点数目明显高于其余4组(F=1 278.134,P＜0.01),差异有统计学意义.A～E组5组血管总长度分别为(14 300 ±956)、(19 215±439)、(24 492±565)、(19 071±893)、(12 799±561) μm,C组微血管总长度明显高于其余4组(F=12.532,P＜0.01),差异有统计学意义.C组显示骨内完整微血管网,股骨干骺端骨CD31和Emcn双染标记显示特异性H型微血管.结论 70μm厚度下可满足微血管网的定量分析,实现对大鼠股骨干骺端H型微血管的准确观测.
NETL
NSTL
维普
万方数据
