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过表达铜锌超氧化物歧化酶促进食管癌细胞增殖和Wnt信号通路活化

Overexpression of copper/zinc superoxide dismutase promotes cell proliferation and Wnt signaling pathway activation in esophageal cancer

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目的 探讨食管癌中铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)的表达及其对细胞增殖的影响和机制.方法 选取食管癌组织和癌旁组织各32例,利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和免疫组织化学法检测SOD1表达.将食管癌细胞系KYSE510随机分为3组:对照组、腺相关病毒(AAV)-绿色荧光蛋白(GFP)组和AAV-SOD1组.AAV-GFP组和AAV-SOD1组细胞分别转染AAV-GFP和AAV-SOD1重组病毒载体,对照组则加磷酸盐缓冲液(PBS)处理.利用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性、二氢乙锭(DHE)探针检测活性氧簇(ROS)产生、Western blot检测Wnt5a和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达.两组间比较采用t检验,3组间比较采用单因素方差分析并采用Tukey法进行两两比较.结果 与癌旁组织(1.00±0.33)比较,食管癌组织中SOD1 mRNA表达升高(3.76±0.51,t=-25.595,P＜0.01).食管癌中SOD1蛋白表达水平(1.93±0.35)也高于癌旁组织(1.00±0.28,t=-11.734,P＜ 0.01).转染24、48、72 h后,AAV-SOD1组细胞活性(0.165±0.016、0.283±0.023、0.391±0.036)明显高于对照组(0.133±0.017、0.213±0.028、0.326±0.038)和AAV-GFP组(0.129±0.015、0.209±0.024、0.316±0.032,P＜0.01).转染48 h后,AAV-SOD1组细胞ROS水平(0.757±0.062)明显低于对照组(1.000±0.079)和AAV-GFP组(1.048±0.108,P＜0.01),而SOD1、Wnt5a和β-catenin蛋白表达水平则明显高于对照组和AAV-GFP组(P＜0.01).结论 SOD1的表达在食管癌中升高,过表达SOD1通过抑制ROS和调节Wnt信号通路活化诱导细胞增殖.

张春敭、柳紫阳、盛银良、吴彬、宋亚男、叶贯超、齐宇

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郑州大学第一附属医院胸外科 450052

哈密市中心医院普胸外科 839000

铜锌超氧化物歧化酶 食管癌 细胞增殖 Wnt 活性氧簇

河南省高等学校重点科研项目

19A320053

2020

10.3760/cma.j.cn421213-20200412-01111

中华实验外科杂志
中华医学会

中华实验外科杂志

CSTPCD北大核心
影响因子：0.759
ISSN：1001-9030
年,卷(期)：2020.37(10)
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