目的 探讨环状RNA(circRNA) AAMDC调控非小细胞肺癌细胞A549凋亡的分子机制.方法 在非小细胞肺癌细胞A549中过表达circRNA AAMDC后,膜联蛋白染色分析A549细胞的凋亡水平.通过CSCD在线分析circRNA AAMDC的潜在靶标miRNA.过表达circRNA AAMDC后,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测潜在靶标miRNA的水平.敲低潜在靶标miRNA,膜联蛋白染色分析A549细胞的凋亡水平.通过miRDB分析靶标miRNA的潜在靶标mRNA.过表达靶标miRNA后,实时荧光定量PCR检测潜在靶标mRNA的水平.敲低和过表达靶标mRNA,膜联蛋白染色检测A549细胞的凋亡水平.组间差异通过Student'st检验分析两组单向方差分析.结果 在非小细胞肺癌细胞A549中,过表达circRNA AAMDC后A549细胞的凋亡水平下降(0.31±0.01,0.08±0.02,=17.820,P＜0.05),在A549细胞中miR-1197(1.53 ±-0.51比0.35 ±0.11,t =3.917,P＜0.05)和miR-205-3p的表达下降(1.23±0.24比0.20±0.02,t =7.408,P＜0.05).分别敲低miR-1197和miR-205-3p后,发现敲低miR-1197的A549细胞凋亡水平下降(0.31±0.04比0.12±0.04,t=5.818,P＜0.05),而敲低miR-205-3p的A549细胞凋亡水平无明显变化(0.31±0.04比0.33±0.05,t=0.541,P＞0.05).荧光素酶报告系统发现circRNAAAMDC靶向miR-1197(102.00±6.02比16.02±5.49,t=18.280,P＜0.05).过表达miR-1197后,发现TIAF1的mRNA水平下降(2.53±0.57比0.45±0.09,=6.243,P＜0.05).通过荧光素酶报告系统发现miR-1197靶向TIAF1的3'端非编码区(3'UTR)(101.01±6.02比25.02±5.49,t=16.370,P＜0.05).在非小细胞肺癌细胞A549中,过表达TIAF1后A549细胞的凋亡水平下降(0.31±0.04比0.05±0.01,t=10.920,P＜0.05).敲低TIAF1后A549细胞的凋亡水平上升(0.31±0.01比0.68±0.22,t=2.910,P＜0.05).通过回补实验,发现circRNA AAMDC-miR-1197-TIAF1调控A549的细胞凋亡.结论 circRNA AAMDC靶向miR-1197后导致miR-1197的表达水平降低,而miR-1197靶向TIAF1mRNA导致TIAF1的蛋白水平降低.因此,circRNA AAMDC促使TIAF1水平升高,降低了非小细胞肺癌A549的凋亡水平.
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