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PAK1在幽门螺杆菌联合MNNG诱导人食管上皮细胞分泌IL-8和GRO-α中的作用

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目的 构建PAK1低、高表达人食管上皮细胞(HEEC)稳定细胞株,探究PAK1在幽门螺杆菌(HP)联合N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HEEC分泌趋化因子IL-8和GRO-α中的作用,为食管癌发病机制提供理论依据.方法 利用RNAi技术转染HEEC构建PAK1低表达(PAK1-KD)稳定细胞株,利用过表达慢病毒转染HEEC构建PAK1高表达(PAK1-OE)稳定细胞株;两种细胞分别分为HP+MNNG染毒组、HP染毒组和MNNG染毒组,并设立空白对照组.按感染复数(MOI)=100:1,即细菌:细胞=100:1将HP加入细胞中进行共培养,采用CCK8法计算MNNG半数抑制浓度(IC50).收集染毒后3 h、6 h和9 h的细胞上清液,采用ELISA法测定IL-8和GRO-α含量.结果 相较于空载体对照组(PAK1-NC),PAK1-KD组PAK1基因敲减效率达到84.1％(t=14.627,P=0.004),PAK1-OE组PAK1基因的表达丰度是PAK1-NC组的1,101.646倍(t=16.104,P=0.004).表明成功构建了PAK1低、高表达HEEC稳定细胞株.在PAK1-KD和PAK1-OE细胞中,各染毒组细胞IL-8和GRO-α分泌含量均随染毒时间呈趋势性增加(均P<0.01).在PAK1-KD和PAK1-OE细胞中,相同染毒时间,各组细胞IL-8和GRO-α含量均出现联合染毒组>HP染毒组>MNNG染毒组>对照组,差异有统计学意义(均P<0.05).在相同染毒时间内,与PAK1低表达(PAK1-KD)相比,PAK1高表达(PAK1-OE)显著促进联合染毒组、HP染毒组和MNNG染毒组细胞分泌IL-8和GRO-α,差异有统计学意义(均P<0.05).结论 PAK1作为幽门螺杆菌感染上皮信号通路关键因子,其高表达可促进HP联合MNNG染毒诱导人食管上皮细胞分泌趋化因子IL-8和GRO-α,在食管癌发生中起重要作用.

PAK1Helicobacter pyloriMNNGIL-8GRO-α

郭雨松、李思瑶、陈艳

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310053 浙江中医药大学

314001 嘉兴学院医学院

PAK1 幽门螺杆菌 MNNG IL-8 GRO-α

浙江省自然科学基金项目

LY20H260006

2024

浙江临床医学
浙江中医药大学 浙江省科普作家协会医学卫生委员会

浙江临床医学

影响因子：0.52
ISSN：1008-7664
年,卷(期)：2024.26(2)
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