摘要
目的 采用96孔平底培养板结合琼脂糖凝胶建立人肝癌HepG2细胞三维培养模型,并选择适合的细胞活力检测方法 .方法 预处理96孔板,每孔加入1％ 琼脂糖溶液冷却后备用.将HepG2细胞以1.975×104、2.96×104、4.444×104、6.667×104、1×105个·mL-1每孔100μL接种于预处理的96孔板,通过倒置的显微镜观察细胞球形态并计算细胞球体积.利用酸性磷酸酶法(APH)和噻唑蓝法(MTT)测定细胞活力,比较两种方法的优劣.结果 HepG2细胞在每孔的接种量为1.975×103～1×104个时,在琼脂糖凝胶表面形成较为规则的细胞球,随着细胞接种数量的增加,细胞球的体积逐渐增大,在每孔1.975×103～6.667×103个时细胞呈现出较好的线性关系.APH法及细胞球经消化处理后的MTT法检测结果均显示,随着细胞接种数量的增加,吸光度逐渐增加,呈现出较好的线性关系,但细胞球消化操作复杂.结论 采用96孔平底培养板结合琼脂糖凝胶培养法建立人肝癌HepG2细胞三维培养模型,并结合APH法进行细胞活力检测,此方法简单、便捷、准确、经济,可用于进一步的药物活性筛选及机制研究.
基金项目
2019 年辽宁省大学生创新创业训练计划资助项目(201910149156)
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