摘要
目的:分析食品中沙门氏菌分子检测靶点的筛选与发掘.方法:利用BLAST技术对食品中的沙门氏菌属具有特异性的DNA片段进行选择,并对其进行随机选择,挑选其中的15个作为靶点,并用27对引物对该靶点的特异性、灵敏度加以评价,并从中选择出具有最佳检测性的引物.结果:经过对27对引物检测性的分析,发现其中检测性最好的是FS23,采用这一对引物对菌株进行PCR扩增,在44株沙门氏菌中能够扩增出492 bp的特异性片段,而在其余非沙门氏菌株实验中无法扩增特异性片段,以此作为引物检测沙门氏菌的林敏性达到了11.9 fg/μL ,对于细菌纯培养物的灵敏度达到了4.9×102cfu/mL.对被沙门氏菌污染的牛奶进行检测,当其菌落浓度在100 cfu/25mL时,只需要5h时的时间即可以检测出沙门氏菌.结论:利用引物FS23对沙门氏菌能够进行有效的检测,并且其具有较高的特异性和灵敏性,是目前应用比较广泛的检测靶点.
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