一种制备19-去甲睾酮完全抗原及单克隆抗体的方法的建立

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中文摘要：本文旨在建立一种制备19-去甲睾酮完全抗原及单克隆抗体的方法。通过丁二酸酐将19-去甲睾酮（19β NT）半抗原与牛血清白蛋白（BSA）偶联得到偶联物（19β NT-HAS-BSA），以此进行免疫、筛选，最终获得3株阳性杂交瘤细胞（4D5，6F2，7E7），并制得相应的单克隆抗体。用间接竞争酶联免疫法，对7E7株抗体进行鉴定，发现：抗体的亲和常数为3.35×108 L/mol，半抑制浓度为0.35 ng/mL，表明此抗体对19-去甲睾酮有很强的亲和力；以19-去甲睾酮为参照物，抗体对丙酸诺龙的交叉反应率为80.3%，对甲基睾酮、睾酮、群勃龙、己烯雌酚等的交叉反应率均小于0.2%，表明此抗体具有良好的特异性。由此可知，7E7株抗体可用于对19-去甲睾酮、丙酸诺龙的免疫分析。

作者：

谢冬霞、钟松清、刘家飞、孙新林、黄媚、涂敏敏、程芳芳

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作者单位：

深圳市三方圆生物科技有限公司广东深圳 518000

关键词：

19-去甲睾酮单克隆抗体间接竞争酶联免疫法交叉反应率

出版年：

2015

中外食品工业

ISSN：1672-5336

年,卷(期)：2015.(4)