中外食品工业2015,Issue(4) :43-44.

一种制备19-去甲睾酮完全抗原及单克隆抗体的方法的建立

谢冬霞 钟松清 刘家飞 孙新林 黄媚 涂敏敏 程芳芳
中外食品工业2015,Issue(4) :43-44.

一种制备19-去甲睾酮完全抗原及单克隆抗体的方法的建立

谢冬霞 1钟松清 1刘家飞 1孙新林 1黄媚 1涂敏敏 1程芳芳1
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  • 1. 深圳市三方圆生物科技有限公司 广东深圳 518000
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摘要

本文旨在建立一种制备19-去甲睾酮完全抗原及单克隆抗体的方法。通过丁二酸酐将19-去甲睾酮(19β NT)半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联得到偶联物(19β NT-HAS-BSA),以此进行免疫、筛选,最终获得3株阳性杂交瘤细胞(4D5,6F2,7E7),并制得相应的单克隆抗体。用间接竞争酶联免疫法,对7E7株抗体进行鉴定,发现:抗体的亲和常数为3.35×108 L/mol,半抑制浓度为0.35 ng/mL,表明此抗体对19-去甲睾酮有很强的亲和力;以19-去甲睾酮为参照物,抗体对丙酸诺龙的交叉反应率为80.3%,对甲基睾酮、睾酮、群勃龙、己烯雌酚等的交叉反应率均小于0.2%,表明此抗体具有良好的特异性。由此可知,7E7株抗体可用于对19-去甲睾酮、丙酸诺龙的免疫分析。

关键词

19-去甲睾酮/单克隆抗体/间接竞争酶联免疫法/交叉反应率

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出版年

2015
中外食品工业

中外食品工业

ISSN:1672-5336
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